贝博®BBcellProbe®细胞膜染色试剂DiI（BB-441916）是一种橙色荧光标记的细胞膜探针，激发波长为549nm，最大发射波长为565nm。此染色剂通过与细胞膜中的脂质分子结合，能够有效标记细胞，非常适合用于细胞运动监测和定位分析。

由于其良好的染料稳定性，DiI展现出强烈而稳定的橙红色荧光，能够与绿色荧光染料及蛋白质产生良好的荧光分辨性，这使其成为多重指标染色的理想选择。该荧光探针在细胞膜扩散后，可以在最佳浓度下实现整个细胞膜的均匀染色。染色前，DiI的荧光强度较弱，结合细胞膜后其荧光强度显著增强，激发后可发出橙色荧光，具有高淬灭常数和激发态寿命。

荧光探针DiI通常不会对细胞活力造成明显影响，因此它被广泛应用于各种细胞（如神经细胞）的正向或逆向标记，包括活细胞及固定细胞的长期示踪。除了基础的细胞膜荧光标记外，DiI还可用于检测细胞的融合与粘附、开发或移植过程中的细胞迁移，以及通过FRAP（荧光恢复后光漂白）检测细胞膜上的脂质扩散。这些特性使得金年会金字招牌诚信至上的DiI成为生物医学研究中的重要工具。

在适当的工作浓度下，DiI不表现出细胞毒性，不会影响细胞的增殖能力。检测方法包括激光共聚焦显微镜、荧光显微镜及流式细胞仪，样本类型可包括悬浮细胞及贴壁细胞。

### 染色工作液的配制

根据样本数量，使用HBSS或适当的无血清培养基，将DiI探针按照500-2500倍进行稀释，制备染色工作液。

### 细胞染色步骤

1. 使用PBS洗涤细胞两次。

2. 加入适量的染色工作液重悬细胞。

3. 在37℃下孵育细胞，可以以20分钟作为起始时间，并根据需要优化染色时间以实现均匀标记。

4. 孵育结束后，离心5分钟，倾倒上清液，重新加入预热至37℃的培养基重悬细胞，重复洗涤步骤多次以去除未结合的探针。

### 针对贴壁细胞的染色

1. 使用PBS洗涤细胞两次。

2. 在细胞培养板或贴片上加入染色工作液，37℃孵育适当时间。

3. 吸干染色工作液，用预热的培养基覆盖细胞，孵育后吸干以去除多余探针。

最后，通过荧光显微镜或流式细胞仪测定细胞的荧光信号，确保激发波长为549nm，最大发射波长为565nm。这一过程体现了金年会金字招牌诚信至上对于生物研究产品的追求与承诺。