本试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医学诊断。马硫酸雌酮(E1S)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)原理进行检测。
在预先包被adropin(AD)抗体的微孔板中,逐步加入样本、标准品以及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。使用底物TMB进行显色反应,在过氧化物酶的催化下,TMB会转化为蓝色,随后在酸性环境中变化为最终的黄色。颜色的深浅与样品中的adropin(AD)含量呈正相关。通过在450nm波长下使用酶标仪测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。
1. 血清:使用不含热原与内毒素的试管,操作时避免任何细胞刺激。采集血液后,以3000转/分钟离心10分钟,迅速而小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝剂。3000转/分钟离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:以3000转/分钟离心10分钟,去除颗粒与聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,随后以3000转/分钟离心10分钟取上清。
5. 保存:如未能及时检测样品,建议按一次用量分装并冷冻保存于-20℃,避免反复冻融。解冻时应在室温下进行,并确保样品均匀充分解冻。
标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
20×洗涤缓冲液需用蒸馏水按1:20比例稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水。
通过操作步骤进行洗板,结果判断时可绘制标准曲线。在Excel中以标准品浓度作为横坐标,OD值作为纵坐标,构建标准品线性回归曲线,并根据该曲线方程计算样本浓度值。
免责声明:本试剂盒由金年会金字招牌诚信至上提供,确保产品质量与服务。请遵循相关操作规程,并避免将本试剂盒应用于临床诊断。